■ 基本信息
啟動(dòng)子: | GAP |
復(fù)制子: | pUC |
終止子: | AOX1 TT |
質(zhì)粒分類(lèi): | 酵母系列，畢赤酵母表達(dá)載體 |
質(zhì)粒大小: | 2882bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | C-Myc, C-His |
原核抗性: | Zeo |
真核抗性: | Zeo |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達(dá)宿主: | 酵母細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，YPD |
誘導(dǎo)方式: | 無(wú)須誘導(dǎo) |
5'測(cè)序引物:
| pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA
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3'測(cè)序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT
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■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 酵母菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類(lèi)型: |
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片段物種: |
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原核抗性: | Zeo |
真核抗性: | Zeo
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）的酶在許多生物細(xì)胞中包括畢赤酵母，穩(wěn)定高水平表達(dá)。最近，GAPDH蛋白編碼基因啟動(dòng)子（GAP）被深入研究，并在畢赤酵母中能夠高水表達(dá)重組蛋白，這取決于使用的碳源（Waterham等人，，1997）。GAP啟動(dòng)子（PGAP）的重組蛋白表達(dá)水平略高于AOX1啟動(dòng)子。
pGAPZ A，B，和C載體（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）載體使用GAP啟動(dòng)子在畢赤酵母中穩(wěn)定表達(dá)重組蛋白。重組蛋白表達(dá)為為帶有C-末端myc抗原表位和C端His標(biāo)簽的融合蛋白。此外，pGAPZα表達(dá)的融合蛋白在N-端帶有釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信號(hào)肽。這兩個(gè)系列的載體都提供三個(gè)不同讀碼框的載體，以方便克隆的帶有C-端標(biāo)簽和/或N-末端分泌信號(hào)肽的載體中。這些載體是基于顯性選擇標(biāo)記，Zeocin（博萊霉素）的篩選標(biāo)記可以同時(shí)使用于畢赤酵母和大腸桿菌。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載：
ZK929pGAPZB畢赤酵母質(zhì)粒.txt
