■ 基本信息
別名: | pET17b |
啟動(dòng)子: | T7 |
復(fù)制子: | pBR322 |
終止子: | T7 terminator |
質(zhì)粒分類(lèi): | 大腸系列質(zhì)粒；大腸表達(dá)質(zhì)粒；pET系列質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 3306bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | N-T7 |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37℃，有氧，LB |
表達(dá)宿主: | BL21(DE3)等大腸桿菌 |
誘導(dǎo)方式: | IPTG或乳糖及其類(lèi)似物 |
5'測(cè)序引物: | T7：TAATACGACTCACTATAGGG |
3'測(cè)序引物: | T7-ter：TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類(lèi)型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pET-17b質(zhì)粒是一種原核表達(dá)載體，N端含有一個(gè)T7標(biāo)簽。該質(zhì)粒含有多個(gè)常用的酶切位點(diǎn)，便于不同基因克隆。表達(dá)由宿主細(xì)胞提供的T7 RNA聚合酶誘導(dǎo)，目的基因被克隆到質(zhì)粒載體上，受噬菌體強(qiáng)轉(zhuǎn)錄及翻譯信號(hào)控制。
pET系統(tǒng)是有史以來(lái)在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白的功能最強(qiáng)大的系統(tǒng)，也是現(xiàn)今原核表達(dá)方面使用最廣泛的系統(tǒng)。該系列質(zhì)粒能很容易的通過(guò)降低誘導(dǎo)物的濃度來(lái)削弱蛋白表達(dá)。在非誘導(dǎo)條件下，可以使目的基因處于完全沉默狀態(tài)而不轉(zhuǎn)錄。
The pET-17b vector carries an N-terminal 11aa T7?Tag? sequence followed by a region of useful cloning sites. Included in the multiple cloning region are dual BstX I sites, which allow efficient cloning using an asymmetric linker. Unique sites (except for the two BstX I sites) are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circluar map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below.質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載：
ZK148pET-17b大腸表達(dá)質(zhì)粒.txt
