■ 產(chǎn)品簡介
組織/細(xì)胞裂解時會釋放出大量內(nèi)源性蛋白磷酸酶，以各種方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，導(dǎo)致不同于正常生理狀態(tài)的差異。因此，裂解后的Western blotting，免疫共沉淀檢測磷酸化蛋白質(zhì)、和蛋白激酶活性測定等實(shí)驗(yàn)常規(guī)要加入外源性蛋白磷酸酶抑制劑，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，維持蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)。
本公司研制的蛋白磷酸酶抑制劑復(fù)合物以國際上主流配方改進(jìn)而成，主要成份為5種獨(dú)立的蛋白磷酸酶抑制劑（釩酸鈉、氟化鈉、鉬酸鈉、酒石酸鈉、咪唑），每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白磷酸酶活性。該復(fù)合物優(yōu)化的組成使其可以強(qiáng)烈抑制幾乎所有重要的蛋白磷酸酶活性，包括蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶以及ATP酶等。該復(fù)合物為100倍濃縮溶液，可直接加入任何組織類型和細(xì)胞的裂解產(chǎn)物中，均能有效抑制磷酸化蛋白質(zhì)的去磷酸化，從而維護(hù)蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)。適用于Western blot和免疫共沉淀檢測磷酸化蛋白質(zhì)、蛋白激酶活性測定等。
■ 適用范圍
抑制蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶。
■ 產(chǎn)品儲存
－20℃保存，一年有效。
■ 操作步驟
臨用前室溫溶解磷酸酶抑制劑復(fù)合物 (100×)，混勻，按照1：100比例加入到組織細(xì)胞裂解物中。
提示：
→ 避免反復(fù)凍融，第一次使用后，可按照每次使用量分裝凍存。
臨用前加入，終濃度為1×，蛋白磷酸酶含量特別豐富的組織，可以用2-3×。
蛋白磷酸酸酶抑制劑I（100X）主要成分及靶點(diǎn)：
成份
| 濃度
| 靶點(diǎn)
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氟化鈉
| 100 mM
| 酸性磷酸酶
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正釩酸鈉
| 100 mM
| 堿性磷酸酶，ATP酶，蛋白酪氨酸磷酸酶
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酒石酸鈉
| 400 mM
| 酸性磷酸酶
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鉬酸鈉
| 115 mM
| 酸性和磷酸蛋白磷酸酶
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咪唑
| 200 mM
| 堿性磷酸酶
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