產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品是專用于染料法（SYBR GreenⅠ）實時熒光定量PCR 的預(yù)混體系。試劑含有加樣示蹤作用的藍(lán)色染料，不影響SYBR Green I熒光的信號采集。2×濃度，操作簡單方便；新一代的高效熱啟動酶，針對qPCR優(yōu)化的PCR buffer與增強(qiáng)劑，使本產(chǎn)品特異性強(qiáng)，靈敏度高，在寬廣的模板濃度范圍可以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可信度高。本產(chǎn)品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye，適應(yīng)于所有qPCR儀器，無需在不同的儀器上調(diào)整ROX的濃度，只需在配制反應(yīng)體系時加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增。
產(chǎn)品特點：
1.擴(kuò)增效率高、特異性強(qiáng)、靈敏度高、低拷貝擴(kuò)增依然完美。
2.重復(fù)性好，數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確，實驗更具有說服力。
3.速度快、預(yù)變性時間短。
4.穩(wěn)定性好、室溫一個月性能無下降。
5.特殊的ROX參比染料，適用于所有qPCR儀，無需在不同的儀器上調(diào)整ROX濃度。
6.試劑含有加樣示蹤作用的藍(lán)色染料，不影響SYBR Green I熒光的信號采集；方便客戶確認(rèn)是否加入該試劑。
實驗數(shù)據(jù)圖：
三步法熒光定量PCR
步驟 | 溫度 | 時間 |
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預(yù)變性 | 95℃ | 30 s |
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變性 | 95℃ | 10 s | 35-40 個循環(huán) |
退火 | 56-64℃ 1） | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2） |
融解曲線分析 3） | | | |
| 95℃ | 15 s |
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| 60℃ | 1 min |
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| 95℃ | 15 s |
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| 60℃ | 15 s |
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注意：
1）無法得到理想的擴(kuò)增效率時，適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時，提高退火溫度。
2）對于300bp以內(nèi)的片段，延伸時間30s即可，200bp以內(nèi)的片段，延伸時間20s即可。
3）本說明是以ABI 7500熒光定量PCR儀為參照設(shè)定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。
